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Nat Biotechnol:韩国学者利用CRISPR技术编辑单核苷酸小鼠

摘要 : 2017年2月27日,国际学术权威刊物自然出版集团旗下子刊《Nature Biotechnology》杂志在线发表了韩国基础科学研究所Jin-Soo Kim研究员的一篇研究论文,研究论文报道了一种CRISPR-Cas9的变体,获得了具有单核苷酸差异的小鼠。
2017年2月27日,国际学术权威刊物自然出版集团旗下子刊《Nature Biotechnology》杂志在线发表了韩国基础科学研究所Jin-Soo Kim研究员的一篇研究论文,研究论文报道了一种CRISPR-Cas9的变体,获得了具有单核苷酸差异的小鼠。 研究人员分别改变了肌营养不良蛋白基因(Dmd),以及酪氨酸酶基因(Tyr)中的单个核苷酸,用以检验CRISPR-nCas9胞苷脱氨酶的融合。 研究获得了两方面的成功:携带Dmd基因单个核苷酸突变的小鼠胚胎,导致小鼠肌肉中无法产生dystrophin蛋白;另外一种是携带Tyr突变的小鼠,显示的病症是白化病性状。Dystrophin蛋白与肌肉肌营养不良症疾病相关,酪氨酸酶控制黑素的生成。 而且,这些单核苷酸取代也仅出现在靶标位置,这十分重要的,因为这意味着只有正确的核苷酸被取代。“我们首次在动物胚胎中成功实现了有效诱导碱基置换,产生了具有疾病表型的突变小鼠,这是一个原理验证实验,下一个目标将是纠正动物的遗传缺陷,并最终用于人类胚胎中的基因校正,”文章作者KIM Jin Soo表示。 原文链接: Highly efficient RNA-guided base editing in mouse embryos 原文摘要: base editors (BEs) composed of a cytidine deaminase fused to CRISPR–Cas9 convert cytidine to uridine, leading to single-base-pair substitutions in eukaryotic cells. We delivered BE mRNA or ribonucleoproteins targeting the Dmd or Tyr gene via electroporation or microinjection into mouse zygotes. F0 mice showed nonsense mutations with an efficiency of 44–57% and allelic frequencies of up to 100%, demonstrating an efficient method to generate mice with targeted point mutations. 来源: Nature Biotechnology 浏览次数:0
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