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4.4 RNA pull - down Model Figures

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摘要 : 实验相关产品 名称 品牌 货号 相关链接 RNA pull-down实验服务 广州赛诚生物科技有限公司 实验技术流程 点击 这里 链接至技术文章《RNA pull-down实验技术流程》。 实验常见问题 点击 这里 链接至技术文章《RNA pull-down实验常见问题》 结果分析 对于一幅RNA pull-down实验结果Figure,应包含位点作用示意图、WB或质谱结果数据分析图,并应在Supplement中补充相关的验证性实验图片,具体如下图所示。 RNA 序列: G表示空间构象的变化, AS表示互补链的的二级结构, S表示正义链的二级结构。 Figure A: 用不同的A、AS、G RNA序列去Pulling Down蛋白符合物,并用不同的KCL浓度梯度洗脱。蛋白抗体NCL hnRNP U hnRNP F RPL7 hnRNP K的单抗进行WB实验。检测A AS G特定区段的结合的蛋白复合物的组分。 Figure B: RNA Pull down后的将蛋白复合物进行质谱实验,发现结合蛋白NCL的肽段。不同RNA构象A、AS、G结合的肽段的不同。 Figure C: 通过重组NC
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实验技术流程
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实验常见问题
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结果分析
对于一幅RNA pull-down实验结果Figure,应包含位点作用示意图、WB或质谱结果数据分析图,并应在Supplement中补充相关的验证性实验图片,具体如下图所示。
4.4 RNA pull - down Model Figures
RNA 序列: G表示空间构象的变化, AS表示互补链的的二级结构, S表示正义链的二级结构。 Figure A: 用不同的A、AS、G RNA序列去Pulling Down蛋白符合物,并用不同的KCL浓度梯度洗脱。蛋白抗体NCL hnRNP U hnRNP F RPL7 hnRNP K的单抗进行WB实验。检测A AS G特定区段的结合的蛋白复合物的组分。 4.4 RNA pull - down Model Figures Figure B: RNA Pull down后的将蛋白复合物进行质谱实验,发现结合蛋白NCL的肽段。不同RNA构象A、AS、G结合的肽段的不同。 4.4 RNA pull - down Model Figures Figure C: 通过重组NCL到GST上,通过GST Pull down 捕获符合物,进行qRT-PCR检测RNA片段AS、S、G和细胞组成型表达RNA(Unbound RNA GAPDH)。 4.4 RNA pull - down Model Figures Figure D: RNA Pull down结果进行SDSPAGE电泳检测。上面四泳道分别为不同的RNA捕获方式,UTP生物素化,无生物素化等。 4.4 RNA pull - down Model Figures Supplement: A RNA motif(结构域)注释和motif生物素化结合链霉亲和素。 4.4 RNA pull - down Model Figures B 在不同的处理条件下(ATP depletion)下进行RNA pulling down后用 Cup和Smaug 蛋白单抗进行WB检测。 4.4 RNA pull - down Model Figures C RNA Pull down的RNA探针,在加上Cap帽子结构和不加帽子的情况下捕获的蛋白用elF4G翻译延伸因子 CuP蛋白进行WB。有帽子结构的才能有翻译效应。 4.4 RNA pull - down Model Figures
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